昆蟲表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)蛋白的優(yōu)缺點(diǎn)及其制備步驟

　　昆蟲表達(dá)系統(tǒng)相信大家都不會陌生，它是四大蛋白表達(dá)系統(tǒng)之一(主要包含：原核細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)、酵母表達(dá)系統(tǒng)、昆蟲表達(dá)系統(tǒng)以及哺乳動物表達(dá)系統(tǒng))。關(guān)于昆蟲表達(dá)系統(tǒng)我們在前面和大家簡單介紹過，今天我們再和大家具體聊聊有關(guān)昆蟲表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)缺點(diǎn)及其詳細(xì)的制備步驟。

　　昆蟲表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)：

　　1、能夠輕松時(shí)間糖基化、乙?；⒘姿峄确g修飾操作;

　　2、分子特性相對簡單，使得其操作起來更加的簡單;

　　3、因?yàn)槠浼?xì)胞能夠懸浮生長，使得其培養(yǎng)起來更加的簡單;

　　4、對于外源基因能夠?qū)崿F(xiàn)高效表達(dá)且其繁殖不受外源基因影響;

　　昆蟲表達(dá)系統(tǒng)的步驟：

　　1、引物設(shè)計(jì)與合成

　　選擇合適的基因序列，并將目的基因引入到序列中;

　　2、基因擴(kuò)增與克隆

　　通過所得RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)率，合成我們所需的cDNA，并以cDNA為模板，對其進(jìn)行擴(kuò)增和測序;

　　3、病毒質(zhì)粒構(gòu)建

　　將擴(kuò)增所得基因克隆到質(zhì)粒中，并對其進(jìn)行培育、擴(kuò)增;

　　4、表達(dá)蛋白

　　通過設(shè)計(jì)合理的表達(dá)環(huán)境，對所得基因序列進(jìn)行表達(dá)，獲得蛋白表達(dá)產(chǎn)物的混合液;

　　5、蛋白純化及鑒定

　　通過蛋白純化的手段對蛋白進(jìn)行提取和純化，并對純化后的蛋白進(jìn)行鑒定，以測定所得蛋白是否符合我們需求;

　　大家應(yīng)該不難看出，昆蟲表達(dá)系統(tǒng)和其他表達(dá)系統(tǒng)的表達(dá)步驟之間并不存在太大的差別，只是在選擇宿主方面存在著不同，其他步驟大概類似。但是，想要表達(dá)成功，則有很多細(xì)節(jié)方面需要引起注意，而恰恰是這些細(xì)節(jié)制約著所得蛋白是否能夠滿足需求。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供昆蟲表達(dá)蛋白服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。

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