普健生物提供的分子間相互作用服務(wù)基于BiacoreTM、openSPR兩大系統(tǒng),其原理是基于表面等離子體共振 (SPR)技術(shù),能夠快速實(shí)現(xiàn)對(duì)分子間(蛋白與蛋白、抗原與抗體、蛋白與小分子)親和力的定性以及定量分析。與傳統(tǒng)的GST pull down,免疫共沉淀等相比,具有更高的靈敏度、檢測(cè)通量及較低的樣品要求等優(yōu)點(diǎn)。
表面等離子體共振 (SPR)親和力測(cè)定是一種基于光學(xué)的無(wú)標(biāo)記檢測(cè)技術(shù),用于實(shí)時(shí)檢測(cè)兩個(gè)或多個(gè)分子之間的分子互作。SPR親和力檢測(cè)是一種通過(guò)傳感器芯片跟蹤信號(hào)變化來(lái)檢測(cè)分子相互作用的方法。SPR信號(hào)通過(guò)折射率變化呈現(xiàn),它指的是響應(yīng)單位 (RU) 大約相當(dāng)于1pg/mm2的蛋白質(zhì)表面濃度。在兩個(gè)分子之間的相互作用過(guò)程中,隨時(shí)間繪制SPR信號(hào)會(huì)產(chǎn)生傳感圖,該圖可以實(shí)時(shí)可視(圖 1)。一般結(jié)合反應(yīng)包括三個(gè)階段:結(jié)合、平衡和解離;將這些傳感圖數(shù)據(jù)與數(shù)學(xué)模型擬合,科學(xué)家們可以計(jì)算關(guān)聯(lián) (Ka) 和解離 (Kd) 速率常數(shù),并最終確定結(jié)合親和力(KD)。與基于平衡點(diǎn)測(cè)量抗體結(jié)合親和力的等溫量熱法 (ITC) 不同,SPR可以獲得完整的動(dòng)力學(xué)參數(shù)來(lái)評(píng)估結(jié)合和解離的所有影響以及抗體親和力。