蛋白純化實驗中出現(xiàn)沉淀的原因分析

　　在蛋白制備實驗過程中，蛋白純化可以說是一個非常重要的問題，只有將蛋白純化到一定濃度后，蛋白的作用才會更強，實驗的才能更好達到我們想要的效果。但是，在實驗中我們常常會遇到各種各樣的問題，比如蛋白沉淀，就是非常常見的問題之一。那么，到底是什么原因導致蛋白沉淀的呢?今天普健生物就和大家具體分析分析。

　　如果完全按照實驗設計過程而來的話，一般都不會出現(xiàn)沉淀的情況，如果發(fā)生沉淀，那么就一定是外部環(huán)境發(fā)生了變化。

　　1、PH值變化。理論上來說，蛋白有一個等電點，當PH值在蛋白等電點附近的時候，就會出現(xiàn)蛋白沉淀的現(xiàn)象;

　　2、濃度過高。日常實驗中，我們配置的溶液環(huán)境不一定符合蛋白的生存環(huán)境，除了溫度和PH值外，最主要的就是鹽離子濃度。如果鹽離子濃度過高的話，就會出現(xiàn)鹽析現(xiàn)象，最終造成蛋白沉淀;

　　3、重金屬脫落。在對蛋白進行Ni純化處理時，其中的一些鎳離子會脫落，而這些脫落的重金屬則會造成蛋白的沉積，最終造成沉淀現(xiàn)象;

　　4、凍融次數(shù)過多。對蛋白進行反復凍融會在一定程度上傷害蛋白，對離子和緩沖液造成影響;

　　5、滋生細菌。如果將蛋白長時間放置在4度的環(huán)境下，則容易滋生細菌，自然會造成蛋白沉淀;

　　總的來說，造成蛋白的原因都是一些細節(jié)方面的操作問題，如果我們在實驗中嚴格按照實驗步驟，并且時刻關注溶液的PH值、溫度、濃度，同時盡量做到盡快使用，避免反復凍融，這樣，就能從根本上減少蛋白純化中沉淀情況的發(fā)生。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白純化服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。