蛋白純化過程中鎳柱純化的原理及具體步驟

　　蛋白純化過程中常常會(huì)使用到各種方法，通過特異性吸附或者滲透壓等方式提升蛋白純度，鎳柱純化就是其中最常用的方式之一。下面，普健生物和大家具體聊聊有關(guān)鎳柱純化的相關(guān)原理和具體步驟。

　　蛋白鎳柱純化的原理：

　　通過使用鎳柱和His標(biāo)簽之間的親和力來實(shí)現(xiàn)蛋白純化的過程。當(dāng)?shù)鞍捉?jīng)過鎳離子濾膜時(shí)，他們會(huì)和鎳離子結(jié)合，形成鎳-蛋白復(fù)合物，這樣，就能將蛋白從溶液中分離出來。而后，再通過洗脫液將鎳離子和蛋白分開，從而獲得所需蛋白;

　　鎳離子蛋白純化的具體步驟：

　　1、通過將氯化鎳倒入柱子中，平衡好柱子，以提供蛋白最適宜的環(huán)境;

　　2、平衡4個(gè)柱子后放入蛋白中，可以讓蛋白自動(dòng)掛上鎳柱上，這樣效果也會(huì)更好。需要控制好流速，且可以循環(huán)掛柱;

　　3、掛完后，需要加入咪唑來洗脫。一般來說，咪唑會(huì)搶奪Ni的結(jié)合點(diǎn)，會(huì)將蛋白洗脫下來;

　　4、而后可以多洗脫幾次，這樣就能獲得純度更高的蛋白;

　　總的來說，采用鎳柱純化蛋白能夠在一定程度上提升蛋白的純度，但是也只能在一定程度上提升純度。不過隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，相信未來蛋白的純度會(huì)越來越高，相關(guān)成本也會(huì)越來越低。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白純化服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎前來咨詢。