真核細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)因?yàn)槠涓鶕?jù)原核生物蛋白與靶DNA作用設(shè)計(jì)而來,使得其不存在基因的非特異性激活或抑制,能夠提升生物利用率和可塑性,所以在現(xiàn)階段受到了廣泛的使用。不過因?yàn)槊總€(gè)公司的技術(shù)水平不同,操作方式有著一定的不同,使得蛋白表達(dá)量上有著很大的不同。今天,普健生物就和大家具體聊聊有關(guān)真核表達(dá)系統(tǒng)蛋白表達(dá)量低的問題。
一般來說,不同的表達(dá)體系所能表達(dá)的蛋白量是會(huì)受到一定影響的。
在我們完成攜帶有信號(hào)肽的構(gòu)建時(shí),一些蛋白在真核表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)本身就會(huì)很低。但是,如果我們?nèi)コ@個(gè)信號(hào)肽列值后,直接表達(dá)這個(gè)成熟肽,那么蛋白表達(dá)水平會(huì)有非常顯著的提升。
總的來說,蛋白可能表達(dá)了,但是我們用于檢測(cè)的信號(hào)肽卻沒辦法顯示;而如果我們加入信號(hào)肽,會(huì)導(dǎo)致蛋白表達(dá)量變低??梢哉f,這是一個(gè)相互矛盾的結(jié)果,需要發(fā)明新的技術(shù)手段去實(shí)現(xiàn)。