昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)是目前最常用的五大蛋白表達系統(tǒng)之一(哺乳動物表達系統(tǒng)、桿狀病毒昆蟲表達系統(tǒng)、大腸桿菌表達系統(tǒng)、酵母表達系統(tǒng)、枯草芽孢桿菌表達系統(tǒng))。其原理是通過用桿狀病毒去感染昆蟲細胞來表達蛋白的方式。那么,相比其他蛋白表達系統(tǒng)來說,昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)的優(yōu)勢體現(xiàn)在哪些方面呢?
昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)的優(yōu)勢:
1、操作簡單。桿狀病毒的基因組較小,分子生物學特性簡單,相比其他表達系統(tǒng)來說,操作更加簡單;
2、安全性高。桿狀病毒的安全性好,蛋白表達中無需進行額外操作;
3、外源基因攜帶量大??梢约尤敫鞣N外源基因;
4、可折疊與修飾。能夠進行正確的折疊以及翻譯后修飾性操作;
昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)的實驗步驟:
1、載體構(gòu)建。將目標基因插入到桿狀病毒中,通常采用線性或環(huán)狀的DNA質(zhì)粒;
2、細胞轉(zhuǎn)染。將構(gòu)建好的表達載體利用桿狀病毒轉(zhuǎn)染到昆蟲細胞中,使得目標基因合理插入到細胞染色體中;
3、蛋白表達。通過對細胞進行擴增,而后實現(xiàn)目的蛋白在宿主細胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄和表達,以達到目標蛋白的大量表達;
4、蛋白檢測及純化。對目的蛋白的特異性和親和力進行檢測,如果檢測目的蛋白符合需求,則對蛋白進行純化;
在昆蟲桿狀病毒表達時,我們盡量去選擇合適的表達載體,對轉(zhuǎn)染條件進行優(yōu)化,并設計好實驗的步驟,這樣才能在更大程度上保障蛋白的表達。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白表達服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。