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盤點(diǎn)常見的幾種穩(wěn)定細(xì)胞株的構(gòu)建方法

發(fā)表時(shí)間:2023-03-23 訪問次數(shù):1006

  前面我們和大家聊過有關(guān)穩(wěn)定細(xì)胞株的構(gòu)建原理及方法,如果沒有看過,您可以點(diǎn)擊“穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的構(gòu)建-構(gòu)建原理及其構(gòu)建方法盤點(diǎn)”進(jìn)行查看。但是因?yàn)槠?,上次沒能聊到有關(guān)穩(wěn)定細(xì)胞株的構(gòu)建方法。所以,今天普健生物在這里就和大家具體聊聊有關(guān)穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建的幾個(gè)常用方法及其適用范圍。

  穩(wěn)定細(xì)胞株的構(gòu)建方法主要有三種:

  1、單克隆環(huán)法。這個(gè)方法多用于針對(duì)哪些整合率低卻有需要獲得單克隆株的方法。不過相比其他方法來說,這個(gè)方法的工作量相對(duì)較小,只需將轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞按照一定的密度轉(zhuǎn)移到新的細(xì)胞皿中,然后采用藥物進(jìn)行篩選,最后挑選出合適的單克隆細(xì)胞株即可。但是也正因?yàn)椴僮鬟^于見到,導(dǎo)致其中容易出現(xiàn)所產(chǎn)生的細(xì)胞株不純,最終失去生長上的優(yōu)勢(shì),導(dǎo)致失去穩(wěn)定細(xì)胞株;

  2、96孔單克隆稀釋法。這個(gè)方法同樣適用于整合率低的轉(zhuǎn)染或需要得到但隔開了細(xì)胞株的實(shí)驗(yàn)。從理論上來說,這個(gè)方法能夠得到非常單一的單克隆抗體,同時(shí)可以篩選出懸浮穩(wěn)定細(xì)胞株。只不過因?yàn)檫^程繁瑣,所以工作量相對(duì)要大一些;

  3、逆轉(zhuǎn)錄病毒混合克隆制備法。如果需要制備混合穩(wěn)定株,這個(gè)方法就顯得非常的合適了。這個(gè)不僅能讓我們?cè)诙虝r(shí)間內(nèi)獲得穩(wěn)定細(xì)胞株,而且能夠?qū)⑺眉?xì)胞稀釋液轉(zhuǎn)移到新的器皿中,最終獲得單克隆細(xì)胞株。只不過這個(gè)方法需要進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,相對(duì)來說,技術(shù)更加復(fù)雜,需要技術(shù)人員具備一定的實(shí)力才行;

  當(dāng)然了,隨著技術(shù)的發(fā)展,有更多的方法被設(shè)計(jì)出來,能夠應(yīng)對(duì)各種不同的使用場(chǎng)景需求。所以,在后來,我們完全可以選擇一種成本更低工作量更小技術(shù)需求更低的方式。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。