穩(wěn)轉細胞株的構建-構建原理及其構建方法盤點

　　隨著生物技術的發(fā)展，越來越多的方法開始在抗體藥物生產中投入使用?？贵w藥物開發(fā)是一個非常繁瑣的過程，而穩(wěn)定細胞株則幾乎適用于抗體藥物開發(fā)的各個階段。無論是重組蛋白、抗體生產，還是檢測分析和功能性研究，幾乎都適合使用。今天，普健生物就和大家具體聊聊有關穩(wěn)定細胞株構建的原理及方法。

　　其實很多人禁不住地想問：什么是穩(wěn)定細胞株?它到底是個什么操作?

　　所謂的穩(wěn)定細胞株，其實就是能夠實現穩(wěn)定表達的細胞株，基于某一細胞系構建的持續(xù)性過表達或干擾特定基因的細胞系。我們知道一般的細胞是無法實現持續(xù)表達的，而穩(wěn)定細胞株則能夠通過一定的方法讓細胞實現穩(wěn)定持續(xù)性表達;

　　穩(wěn)定細胞株的構建原理是什么?

　　通過基因技術將外源DNA或RNA克隆到具備某種抗性的載體上，重組的載體則會整合到染色體中，并隨著細胞的分裂穩(wěn)定傳導下去，而后再對細胞進行篩選，這樣就能獲得我們所需能夠實現穩(wěn)定表達的細胞株;

　　為什么要用到穩(wěn)定細胞系?

　　1、使用穩(wěn)定細胞系能夠有效降低頻繁轉染的成本;

　　2、可以更好地實現基因干擾表達的結果;

　　3、避免因為人為原因所造成的結果不準確的情況;

　　什么時候需要用到穩(wěn)定細胞系?

　　1、外源基因需要實現長期穩(wěn)定表達時;

　　2、需要使用到誘導表達系統(tǒng)時;

　　3、目的基因過表達或需要跟然時空特異性時;

　　4、細胞或病毒無法實現高傳導效率時;

　　5、需要向動物體內注射外源表達片段細胞時;

　　6、細胞個體存在差異時;

　　7、需要將外源片段插入基因組中時;

　　而目前常用的穩(wěn)定細胞構建方法主要有三種：單克隆環(huán)法、96孔單克隆稀釋法、逆轉錄病毒混合克隆制備法，這些方法我們將在后期和大家具體介紹，本次就不贅述了。

　　總的來說，穩(wěn)定細胞株的構建能夠在極大程度上避免一些重組蛋白所產生的無法表達的情況，以及應對一些細胞無法實現高表達的情況。當然了，穩(wěn)定細胞株也非萬能的，在很多情況下反倒會造成相關資源的損耗，所以，需要結合實際情況來進行選擇。普健生物專業(yè)為您提供穩(wěn)定細胞株構建服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。