如何使用單B細胞技術(shù)制備兔單克隆抗體?

　　單克隆抗體制備是一項精細且復(fù)雜的工作，需要通過一系列的手段才能實現(xiàn)抗體的制備。而且隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，單克隆抗體從雜交瘤技術(shù)發(fā)展到現(xiàn)階段使用最為廣泛的單B細胞技術(shù)。

　　單B細胞技術(shù)其實就是通過分離單個B細胞，通過對其進行克隆培養(yǎng)，結(jié)合多種PCR技術(shù)形成的一種體外篩選及表達體系。使用單B細胞技術(shù)制備的單克隆抗體具有高通量、高效率、低細胞數(shù)等優(yōu)點，是現(xiàn)如今最近、最高效的抗體篩選方法之一。

　　單B細胞技術(shù)制備流程：

　　1、鑒定和分離單個B細胞

　　單B細胞分離通常有兩種：隨機分離和抗原特異性分離。通過多次免疫兔子，檢驗血清中抗體含量及質(zhì)量，而后從中分離出B細胞;

　　2、擴增和克隆抗體基因

　　進行細胞分選時，需要將B細胞注入到合適的培養(yǎng)液中，然后對其進行RNA提取并進行逆轉(zhuǎn)錄;

　　3、重組抗體表達

　　對所得DNA進行目的基因表達，獲得相應(yīng)的目標抗體;

　　4、抗體鑒定

　　將所得抗體進行純化(可采用親和層析法或離子交換層析法進行純化)，而后對抗體的特異性和生物活性進行鑒定;

　　5、大規(guī)模生產(chǎn)

　　測定所得目的抗體特異性和生物活性達到我們要求后，開始進行大規(guī)模生產(chǎn);

　　單B細胞技術(shù)制備的單克隆抗體的優(yōu)勢：

　　1、高特異性。和其他動物相比，兔免疫系統(tǒng)更加優(yōu)秀，所得抗體特異性更強;

　　2、高穩(wěn)定性。兔單克隆抗體穩(wěn)定性更高;

　　3、高親和力。兔B細胞的親和力是其他動物的10-100倍;

　　當(dāng)然了，單B細胞兔單克隆抗體制備技術(shù)雖然具備著其他抗體表達系統(tǒng)所不具備的優(yōu)勢，但是，它需要的技術(shù)水平更高，相關(guān)制備成本也更高一些?？偟膩碚f，只有具備相應(yīng)技術(shù)實力的公司才能采用單B細胞技術(shù)制備抗體。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供兔單克隆抗體制備服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。