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重組抗體表達(dá)相信大家已經(jīng)耳熟能詳了，通過(guò)重組抗體表達(dá)技術(shù)，能夠讓我們獲得很多傳統(tǒng)抗體無(wú)法實(shí)現(xiàn)的功能，使得疾病醫(yī)治變得更加的簡(jiǎn)單。但是，對(duì)于很多人來(lái)說(shuō)，重組抗體表達(dá)的成功率不高，但是又和設(shè)計(jì)以及操作沒(méi)有太大關(guān)系。這是為什么呢?今天，普健生物就和大家具體聊聊重組抗體表達(dá)中的一些常見(jiàn)問(wèn)題。
1、重組抗體穩(wěn)定性不高，如何提升?
一般來(lái)說(shuō)，很多重組抗體的穩(wěn)定性都不強(qiáng)，我們可以通過(guò)優(yōu)化洗脫條件，將高PH值逐漸降低，選擇最適合的表達(dá)環(huán)境。同時(shí)，純化的樣本需要及時(shí)進(jìn)行中和，如果有需求，可以選擇邊純化邊中和。對(duì)于純化后的樣品可以選擇在合適的低溫環(huán)境下保存，同時(shí)添加蛋白保護(hù)劑以降低蛋白的溶解速率;
2、哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)，是否選擇CHO?
CHO細(xì)胞的使用范圍非常的廣泛，但是也并不是所有的環(huán)境下都適合。我們需要結(jié)合表達(dá)需求來(lái)進(jìn)行綜合選擇，這樣才能在更大程度上保證重組蛋白的表達(dá)效率;
3、重組抗體的載體要如何選擇?
重組抗體表達(dá)所選載體和細(xì)胞最好配對(duì)使用，如果選擇的非配套的，很容易造成蛋白表達(dá)量低的情況;
4、如何提升重組抗體的表達(dá)量?
其實(shí)就是表達(dá)系統(tǒng)和方法的選擇，盡量選擇表達(dá)量高的系統(tǒng)，表達(dá)細(xì)胞一定要選擇狀態(tài)好活性強(qiáng)的細(xì)胞，如果時(shí)間允許，還需要對(duì)表達(dá)進(jìn)行優(yōu)化，延長(zhǎng)表達(dá)時(shí)間，以便于獲得質(zhì)量更好的抗體;
5、有關(guān)抗體活性方面的判斷。
一般來(lái)說(shuō)，真核表達(dá)系統(tǒng)所表達(dá)的抗體活性要強(qiáng)過(guò)原核表達(dá)，不過(guò)不同的抗體其穩(wěn)定性不同，具體需要結(jié)合實(shí)際需求來(lái)選擇;
6、重組抗體的表達(dá)量可否通過(guò)高通量篩選來(lái)實(shí)現(xiàn)?
答案是肯定的，采用高通量抗體表達(dá)系統(tǒng)和篩選，能夠有效提升抗體的表達(dá)量，當(dāng)然了，其中的費(fèi)用投入相對(duì)來(lái)說(shuō)也要高一些，所以，我們需要結(jié)合實(shí)際情況來(lái)進(jìn)行選擇;
總的來(lái)說(shuō)，重組抗體表達(dá)過(guò)程中需要注意的事項(xiàng)有很多，一些細(xì)節(jié)方面的操作也能在極大程度上制約著抗體的表達(dá)量。所以，在日常使用中，我們需要嚴(yán)格按照是按步驟來(lái)進(jìn)行相關(guān)操作，這樣才能在更大程度上保證重組抗體的表達(dá)量。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供重組抗體表達(dá)服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢(xún)。
