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雜交瘤測(cè)序的一般流程是怎樣的?

發(fā)表時(shí)間:2023-07-06 訪問次數(shù):840

  在單克隆抗體制備時(shí),我們常常會(huì)選擇雜交瘤抗體制備的方式來(lái)進(jìn)行,而雜交瘤測(cè)序是其中必不可少的一個(gè)過程。因?yàn)殡s交瘤抗體測(cè)序不僅能更好地避免雜交瘤細(xì)胞失活甚至希望的風(fēng)險(xiǎn),而且能更好地保證后期抗體的一致性。那么,雜交瘤測(cè)序一般需要經(jīng)過哪些過程呢?今天,普健生物就和大家詳細(xì)描述一下。

  1、樣本收集。從目標(biāo)雜交瘤中收集細(xì)胞樣本,其中包含DNA或RNA;

  2、核酸提取。使用核酸提取方法從樣本中提取出DNA或RNA(當(dāng)然了,具體方法可以結(jié)合實(shí)際情況來(lái)進(jìn)行選擇);

  3、文庫(kù)構(gòu)建。對(duì)于DNA測(cè)序,這通常涉及將DNA片段進(jìn)行片段化,然后連接到測(cè)序適配體上。對(duì)于RNA測(cè)序,通常先轉(zhuǎn)錄成cDNA,然后進(jìn)行片段化和適配體連接;

  4、PCR擴(kuò)增。對(duì)文庫(kù)中的DNA或RNA片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增,以增加其數(shù)量,以便進(jìn)行下一步的測(cè)序;

  5、基因測(cè)序。使用測(cè)序技術(shù)對(duì)PCR擴(kuò)增的文庫(kù)進(jìn)行測(cè)序;

  6、數(shù)據(jù)分析。對(duì)產(chǎn)生的測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行生物信息學(xué)分析。包括將測(cè)序reads映射到參考基因組或轉(zhuǎn)錄組上,進(jìn)行拼接、變異檢測(cè)、基因表達(dá)分析等;

  7、結(jié)果解釋。根據(jù)數(shù)據(jù)分析的結(jié)果,解釋雜交瘤中的DNA或RNA序列的特征、變異和功能;

  當(dāng)然了,對(duì)于不同公司來(lái)說,其具體的操作流程可能存在一定的差異,但是,總的來(lái)說,大體的過程相差不大,只是在一些細(xì)節(jié)操作方面存在著一定的問題。當(dāng)然了,想要提供雜交瘤測(cè)序服務(wù)需要有相當(dāng)豐富的經(jīng)驗(yàn)以及技術(shù)支持,否則,很難達(dá)到具體的需求。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供雜交瘤測(cè)序服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢。