納米抗體(Nanobody,Nb),即重鏈單域抗體VHH(variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody) ,無輕鏈及CH1區(qū),主要優(yōu)點是分子小、穩(wěn)定性高、免疫原性低、易于人源化、易于連接,并可通過多種途徑進行給藥。此外,在分子設(shè)計時可選擇加入與人血白蛋白結(jié)合的功能區(qū),將半衰期延長至2-3周,并且可以通過白蛋白將藥物運輸至靶位點。這些特點使得VHH在基礎(chǔ)研究、診斷及治療上具有極大的應(yīng)用價值。
普健生物可提供羊駝免疫,納米抗體VHH噬菌體建庫及淘選技術(shù)服務(wù),更有千億級VHH納米抗體天然噬菌體文庫可淘選各類靶點抗原,大大縮短藥物開發(fā)周期。
案例展示
免疫文庫構(gòu)建-效價檢測
血清稀釋倍數(shù) | 未免血清 | 一兔 | 二兔 | 三兔 | 四兔 |
10 | 0.891 | 2.916 | 2.917 | 2.845 | 2.772 |
100 | 0.108 | 1.591 | 2.655 | 2.838 | 2.688 |
1000 | 0.046 | 0.46 | 2.316 | 2.474 | 2.686 |
10000 | 0.013 | 0.33 | 0.619 | 1.038 | 0.954 |
100000 | 0.009 | 0.31 | 0.119 | 0.171 | 0.148 |
1000000 | 0.008 | 0.027 | 0.053 | 0.041 | 0.037 |
10000000 | 0.008 | 0.015 | 0.021 | 0.008 | 0.024 |
PBS | 0.009 | 0.015 | 0.011 | 0.004 | 0.008 |
免疫文庫構(gòu)建-總RNA和VHH鑒定
免疫文庫構(gòu)建-文庫質(zhì)檢
菌落PCR鑒定結(jié)果
多克隆ELASA驗證
多克隆ELISA驗證結(jié)果
第一輪單克隆ELISA驗證
第一輪單克隆ELISA驗證結(jié)果
第二輪單克隆ELISA驗證
第二輪單克隆ELISA驗證結(jié)果
驗證納米抗體與抗原結(jié)合
ELISA驗證重組納米抗體與抗原結(jié)果
親和力測定
重組納米抗體與抗原親和力測定結(jié)果