對單克隆抗體和多克隆抗體有一定的了解后,我們又發(fā)現(xiàn)了一個新的詞:抗體庫,也有稱之為抗體文庫的。因為在涉及噬菌體展示技術(shù)的時候,常常會提到一個詞:噬菌體展示文庫。以前一直不明天,為什么要這么表述。有鑒于此,今天普健生物就和大家一起學習學習。
首先,什么是抗體庫?
顧名思義,抗體庫指的就是機體在受到抗原刺激后,產(chǎn)生的一系列特異性抗體的總和。簡單來說,就是某種抗原刺激機體后,會產(chǎn)生各類抗體,這些抗體的混合物則被稱為抗體庫。
噬菌體抗體庫的構(gòu)建流程為何?
1、提取RNA。通過離心、震蕩、靜置等一系列的手段,提取無RNA酶的RNA;
2、反轉(zhuǎn)錄。將提取出來的RNA通過反轉(zhuǎn)錄的方式,獲得cDNA;
3、抗體片段擴增。通過反轉(zhuǎn)錄cDNA中擴增特定的抗體片段,對其進行片段擴增;
4、克隆到噬菌體上。將擴增所得的多樣DNA進行抗體基因序列和噬菌體載體的酶切,將所需片段克隆到噬菌體質(zhì)粒上;
5、轉(zhuǎn)化菌庫。通過對其連接產(chǎn)物進行電轉(zhuǎn)和培養(yǎng)后,獲得菌庫;
6、擴增并純化。將上一步的菌體混合物進行培養(yǎng)后,通過相關操作對其進行擴增和純化,最終獲得數(shù)量足夠的抗體庫;
當然了,如上我們也只是和大家簡單聊了一下大概的步驟,真是操作的復雜程度非一兩句可以描述得了的。如果您有興趣,可以在我們之前發(fā)布的文章“納米抗體之噬菌體文庫構(gòu)建過程詳解”中進行詳細了解。當然了,如果您想要構(gòu)建噬菌體抗體庫,您也可以直接聯(lián)系普健生物,我們擁有15年蛋白抗體制備經(jīng)驗,為您提供最優(yōu)質(zhì)的服務,歡迎您的來電咨詢。
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