好吧,我承認(rèn),最近我又犯了一個(gè)錯(cuò),本來打算短暫放在4度環(huán)境下的一個(gè)抗體被放了2個(gè)星期,最終導(dǎo)致抗體失去了大部分活性,造成了后期實(shí)驗(yàn)結(jié)構(gòu)沒達(dá)標(biāo)。所以,對(duì)于抗體的保存來說,是非常重要的。如果保存得當(dāng),大部分的抗體都能保存數(shù)月甚至數(shù)年。下面,普健生物就和大家具體聊聊有關(guān)抗體保存的相關(guān)問題。
1、保存溫度
對(duì)于大部分的抗體來說,保存在-20度和-80度下為最佳保存條件。當(dāng)然了,通過分裝后再保存能夠在最大程度上減少對(duì)抗體造成的損耗,而且能夠避免引入污染的情況。當(dāng)然了,有的抗體在分裝后,需要保存在4度的環(huán)境下;
2、溫度特例
對(duì)于偶聯(lián)抗體來說,需要保存在4度的環(huán)境下,如果在-20或-80度的環(huán)境下,可能會(huì)影響到其結(jié)合力,當(dāng)然了,還會(huì)造成蛋白酶活性的降低;
3、污染
對(duì)于制備好的抗體來說,我們需要做好微生物污染預(yù)防,需要將疊氮化鈉加入其中。當(dāng)然了,我們需要注意好疊氮化鈉的濃度,盡量控制在0.02%(w/v)。當(dāng)然了,這只是一部分,還有一些其他緩沖液需要加入到其中,我們需要結(jié)合實(shí)際情況來進(jìn)行選擇;
4、染色處理特例
當(dāng)然了,在需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色處理的時(shí)候,就不能對(duì)其進(jìn)行疊氮化鈉處理,否則會(huì)造成細(xì)胞色素電子傳遞系統(tǒng)。也就是說,具體情況我們需要結(jié)合具體的情況來進(jìn)行處理;
5、蛋白濃度
在實(shí)驗(yàn)時(shí),我們需要將蛋白稀釋到工作濃度,4度環(huán)境下保存不要超過1天,盡量現(xiàn)配現(xiàn)用,不要放置太長(zhǎng)時(shí)間。當(dāng)然了,蛋白的量我們需要多放一些,需要考慮到結(jié)合到容器壁上的損失。同時(shí),不要在偶聯(lián)抗體中加入蛋白穩(wěn)定劑,因?yàn)榉€(wěn)定劑會(huì)造成抗體效率降低的情況;
當(dāng)然了,抗體的保存一定要選擇合適的溫度,如果選擇的溫度過低,會(huì)造成抗體失活。而且不要進(jìn)行反復(fù)凍融,以為你反復(fù)凍融可能會(huì)造成抗體形成聚集體,結(jié)合力會(huì)出現(xiàn)一定程度的降低。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供抗體定制和制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。