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單克隆抗體作為現(xiàn)階段效果最佳、使用范圍最廣的一款藥劑，在臨床試驗(yàn)中起到了良好的效果。但是，現(xiàn)階段常用的一些抗體制備方式中，常常會(huì)出現(xiàn)異源反應(yīng)的情況。不僅會(huì)造成效果達(dá)不到預(yù)期，更有甚者會(huì)造成患者的不良反應(yīng)。作為解決異源性的方法之一，全人源化抗體起到了至關(guān)重要的作用。噬菌體展示技術(shù)作為全人源抗體制備的主要方式，在極大程度上解決了這個(gè)問題。
那么，什么是噬菌體展示技術(shù)呢?
噬菌體展示技術(shù)其實(shí)就是一種高效的基因表達(dá)篩選技術(shù)，它通過將外源蛋白表達(dá)基因剪切到噬菌體的外殼基因中，在噬菌體表達(dá)外殼蛋白的時(shí)候，會(huì)同時(shí)表達(dá)目的蛋白。當(dāng)然了，因?yàn)橐恍┩鈿さ鞍卓赡軙?huì)影響到目的蛋白的效果，我們還可以通過分離和篩選純化等一系列的操作進(jìn)一步提純目的蛋白。
目前噬菌體展示技術(shù)已經(jīng)非常的成熟了，在抗原表位分析、單克隆抗體制備、抗體人源化、藥物篩選等方面有著廣泛的使用。
噬菌體展示技術(shù)的技術(shù)難點(diǎn)體現(xiàn)在哪些方面?
雖然說噬菌體展示技術(shù)存在著如此眾多的優(yōu)點(diǎn)，但是，也并不是說隨便一家公司就可以做的，不僅僅是因?yàn)榧夹g(shù)方面的原因，成本投入也是很大一部分原因。想要噬菌體展示成功，有兩大難點(diǎn)：噬菌體建庫和噬菌體篩選。
1、噬菌體建庫
將從B細(xì)胞內(nèi)提取的抗體輕重鏈抗體片段群與噬菌體外殼蛋白融合，并進(jìn)行融合表達(dá)，使其表達(dá)與噬菌體外殼表面，從而形成噬菌體展示抗體庫。主要分為三種：scFv庫、Fab庫、VHH庫;
2、噬菌體篩選
噬菌體篩選是其中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，主要包括淘篩和鑒定兩個(gè)步驟。
一般在進(jìn)行篩選的時(shí)候，我們需要進(jìn)行報(bào)備抗原及對(duì)照，通過3-4輪的篩選，選擇出合適的抗體。而后再通過多克隆ELISA判斷特異富集，而后通過單克隆ELISA、陽性克隆VALIDATED ELISA來確定克隆測序，最后通過重組抗體表達(dá)的方式來制備所需蛋白;
噬菌體展示技術(shù)的優(yōu)勢體現(xiàn)在哪些方面?
和傳統(tǒng)蛋白制備技術(shù)來說，噬菌體展示技術(shù)制備的蛋白能夠滿足大批量的生產(chǎn)，同時(shí)也可以通過基因技術(shù)，提升抗體在親和力、免疫原性等方面的能力，而且篩選周期短、操作簡單、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)勢。
總的來說，噬菌體展示技術(shù)在極大程度上滿足的我們?cè)诳贵w制備方面的需求。無論是單克隆抗體制備，還是抗體人源化方面，都存在著傳統(tǒng)抗體制備方式所不具備的優(yōu)勢。但是也有著不住之處，比如需要以一定的技術(shù)實(shí)力去攻克建庫以及篩選方面的難題，同時(shí)還需要具備相應(yīng)的經(jīng)濟(jì)實(shí)力。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供噬菌體展示服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。
