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關(guān)于細胞轉(zhuǎn)染你知道多少?

發(fā)表時間:2022-09-16 訪問次數(shù):867

  細胞轉(zhuǎn)染實驗可以說是生物實驗中的一道難關(guān),做得好的話,可以大大降低實驗難度;如果轉(zhuǎn)染率低,那么,再昂貴的細胞也只能報廢。有鑒于此,普健生物今天在這里和大家具體聊聊有關(guān)細胞轉(zhuǎn)染的那些事。

細胞轉(zhuǎn)染

  一般來說,我們可以通過三個途徑來進行細胞轉(zhuǎn)染:物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)。

  物理介導(dǎo):直接通過電穿孔、顯微注射、基因槍等工具,將基因注入到細胞內(nèi)部的方式;

  化學(xué)介導(dǎo):相對來說,化學(xué)介導(dǎo)的方法要多一些,比如通過磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法等;

  生物介導(dǎo):一般采用病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染技術(shù)來實現(xiàn);

  對于細胞轉(zhuǎn)染來說,需要轉(zhuǎn)染效率高一級細胞毒性小等特點。所以,隨著技術(shù)的發(fā)展,病毒介導(dǎo)的方式使用的越來越多,因為它能同時滿足如上的兩種需求。只不過,這種方法需要的技術(shù)水平較高,一般實驗室較難達到要求。

  常用的轉(zhuǎn)染技術(shù)有哪些?

  就現(xiàn)在而言,常用的轉(zhuǎn)染技術(shù)主要有兩種:瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

  瞬時轉(zhuǎn)染(transient transfection):不會將外源的DNA/RNA整合到宿主染色體上,而且一個宿主細胞可以存在多個拷貝數(shù),一般來說生產(chǎn)水平非常的高,但是持續(xù)時間要短很多(通常只能持續(xù)2-3天);

  穩(wěn)定轉(zhuǎn)染(Stable transfected):會將外源DNA/RNA整合到宿主染色體上(也可能作為游離體)。外源DNA在染色體中的表達量低;

  對于瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染來說,不存在那個方法更好的說法,只是說,在不同實驗需求中,哪個方法更加合適。對于那些理想的既能保證高轉(zhuǎn)染率,又能低細胞毒素的情況,幾乎不能能完全實現(xiàn)。只有最合適的方法,沒有最完美的方法。更多細胞轉(zhuǎn)染知識,敬請關(guān)注武漢普健生物。