實(shí)驗(yàn)做多了之后遇到各種各樣的問(wèn)題都不奇怪,無(wú)論是哪方面因素的影響,都可能造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果不盡人意,只要處理好這些問(wèn)題,自然也就不會(huì)出現(xiàn)這樣的問(wèn)題了。比如,我們?cè)谶M(jìn)行蛋白表達(dá)的時(shí)候,常常會(huì)出現(xiàn)表達(dá)量或者出現(xiàn)的結(jié)果不是我們想要的情況,了解這樣因素,能在極大程度上避免這些問(wèn)題。今天普健生物就和大家具體聊聊會(huì)影響到蛋白表達(dá)的因素。
1、蛋白特性。一般來(lái)說(shuō),蛋白分子的大小、物種來(lái)源、蛋白特性、修飾后的翻譯程度以及自身結(jié)構(gòu)的復(fù)雜程度等方面都會(huì)影響到蛋白的表達(dá)。所以,我們?cè)谶M(jìn)行蛋白表達(dá)之前,可以結(jié)合別人的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)進(jìn)行最優(yōu)選擇,提前做好這方面的準(zhǔn)備;
2、宿主選擇。所選擇的宿主直接限制著蛋白的表達(dá)量;
3、需求量。對(duì)于不同需求量的蛋白,所選擇的表達(dá)系統(tǒng)是各不相同的。所以,我們需要結(jié)合具體的需求量來(lái)選擇合適的表達(dá)系統(tǒng);
4、質(zhì)粒選擇。質(zhì)粒是攜帶外源基因的工具,只有選擇合適的載體才能在更大程度上表達(dá)蛋白;
5、融合標(biāo)簽的選擇。標(biāo)簽蛋白決定著蛋白的純化難易程度以及溶解性,因此,融合標(biāo)簽的選擇也在一定程度上制約著蛋白的表達(dá);
6、表達(dá)系統(tǒng)優(yōu)劣。好的表達(dá)系統(tǒng)能更好地促進(jìn)蛋白表達(dá),而差的系統(tǒng),就很難達(dá)成我們的要求了;
總的來(lái)說(shuō),影響蛋白表達(dá)的因素并沒(méi)有太多,我們?cè)诖_定需要表達(dá)的蛋白后,結(jié)合其表達(dá)量,選擇好合適的表達(dá)系統(tǒng)、表達(dá)宿主,同時(shí)利用合適的標(biāo)簽來(lái)優(yōu)化蛋白純化的過(guò)程,這樣就能在極大程度上實(shí)現(xiàn)蛋白表達(dá)。普健生物專業(yè)為提供蛋白表達(dá)服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢。