譯后修飾(post-translational modifications,PTM)是指蛋白質(zhì)在翻譯后經(jīng)歷的一種共價(jià)加工過(guò)程,通過(guò)在一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基上添加修飾基團(tuán),或通過(guò)蛋白質(zhì)水解去除特定基團(tuán),從而改變蛋白質(zhì)的性質(zhì)。PTM類型包括經(jīng)典的磷酸化(phosphorylation)、甲基化修飾(methylation)、 棕櫚?;╬almitoylation),以及新近發(fā)現(xiàn)的乙酰化(acetylation)、丙二酰化(malonylation)、琥珀?;╯uccinylation)、乳酸?;╨actylation)和糖基化(glycosylation)等。修飾性抗體因其能夠特異性識(shí)別被修飾的氨基酸位點(diǎn),廣泛用于對(duì)相關(guān)蛋白質(zhì)的定性和定量分析,是科研人員研究PTM在重要生命過(guò)程(如轉(zhuǎn)錄、重組、復(fù)制、DNA修復(fù)和基因組結(jié)構(gòu)的調(diào)節(jié))中的功能和作用時(shí)不可或缺的試劑。
修飾性抗體類型
磷酸化及磷酸化抗體
磷酸化修飾是指在細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)氨基酸上添加磷酸基團(tuán)的過(guò)程。20世紀(jì)50年代,Edmond Henri Fischer 和 Edwin Krebs 發(fā)現(xiàn)了第一個(gè)蛋白激酶,即環(huán)腺苷酸依賴性蛋白激酶(cyclic-AMP dependent protein kinase, PKA),并首次提出了蛋白質(zhì)可逆磷酸化修飾作為一種生物調(diào)節(jié)機(jī)制存在的概念。蛋白質(zhì)磷酸化修飾是一個(gè)由激酶和磷酸酶共同參與的動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)過(guò)程。激酶負(fù)責(zé)催化蛋白質(zhì)的磷酸化,將三磷酸腺苷(ATP)末端(γ位)的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到底物蛋白的特定氨基酸上,從而進(jìn)行共價(jià)修飾。磷酸酶則通過(guò)水解反應(yīng)催化已發(fā)生磷酸化修飾的氨基酸去磷酸化,將磷酸單酯水解為一個(gè)磷酸基團(tuán)和一個(gè)游離羥基,以去除磷酸基團(tuán)。了解磷酸化修飾的機(jī)制和功能對(duì)于研究細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和生物調(diào)節(jié)至關(guān)重要。
磷酸化抗體能夠特異性識(shí)別特定的磷酸化位點(diǎn),從而檢測(cè)蛋白在細(xì)胞受到刺激時(shí)磷酸化水平的增強(qiáng)或減弱。這些抗體反映了蛋白功能狀態(tài)的變化,適用于磷酸化蛋白的定性和定量分析。磷酸化抗體在免疫學(xué)、生物化學(xué)、腫瘤學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)中得到了廣泛應(yīng)用,尤其在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞凋亡和癌癥等生命科學(xué)研究領(lǐng)域中起著重要作用。
甲基化及甲基化抗體
蛋白質(zhì)甲基化是由甲基化酶催化作用于蛋白質(zhì)特定殘基的一種重要?jiǎng)討B(tài)修飾和生物學(xué)現(xiàn)象,參與調(diào)控蛋白質(zhì)信號(hào)通路。常見的甲基化修飾包括DNA甲基化、RNA甲基化和組蛋白甲基化。由于甲基化修飾在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、基因功能和遺傳改變中起著重要作用,甲基化特異性抗體的制備顯得尤為重要。甲基化抗體能夠特異性識(shí)別特定的甲基化氨基酸位點(diǎn),用于區(qū)分蛋白質(zhì)的甲基化和非甲基化形式。它們可以對(duì)甲基化蛋白質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析,廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、生物化學(xué)、腫瘤學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)等生命科學(xué)研究領(lǐng)域。
乙?;耙阴;贵w
蛋白質(zhì)乙?;亲畛R姷孽;揎楊愋椭?,最早由Allfrey等人在1963年于組蛋白上首次發(fā)現(xiàn)。根據(jù)乙?;揎棸l(fā)生的位置不同,乙?;揎椏梢苑譃槿N類型:Nα-乙酰化、Nε-乙酰化和O-乙?;?。這些修飾在調(diào)控蛋白質(zhì)功能和細(xì)胞過(guò)程方面具有重要作用。
乙?;贵w能特異性識(shí)別靶蛋白的乙?;问郊疤囟ㄒ阴;被嵛稽c(diǎn),檢測(cè)該蛋白質(zhì)的活性水平,用于區(qū)分蛋白質(zhì)乙?;头且阴;拇嬖谛问?,對(duì)乙?;鞍走M(jìn)行定性、定量分析,在細(xì)胞周期的調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、神經(jīng)退行性疾病、代謝疾病、癌癥的發(fā)生發(fā)展等生命科學(xué)研究中應(yīng)用廣泛。
修飾性抗體制備服務(wù)普健生物提供的一站式修飾性抗體制備服務(wù),包括多肽的設(shè)計(jì)與合成、多肽偶聯(lián)、動(dòng)物免疫、抗體純化和QC檢測(cè)等。普健生物在修飾性抗體定制開發(fā)方面具有豐富的經(jīng)驗(yàn),可提供磷酸化磷酸化抗體、甲基化抗體、乙?;贵w的多克隆抗體服務(wù)和單克隆抗體服務(wù)。
服務(wù)周期
6-8周
服務(wù)內(nèi)容
修飾性多肽設(shè)計(jì)與合成:根據(jù)客戶提供的抗原蛋白序列和修飾位點(diǎn)免費(fèi)進(jìn)行抗原設(shè)計(jì),依照客戶需求合成修飾性多肽和非修飾性多肽
動(dòng)物免疫:多肽抗原將被用來(lái)免疫動(dòng)物(大鼠/小鼠/兔)并激發(fā)其產(chǎn)生針對(duì)特定抗原的抗體??商峁┌ㄍ?、小鼠、大鼠、豚鼠、羊、雞的多克隆抗體定制服務(wù)以及大鼠、小鼠的單克隆抗體定制服務(wù)。
血清效價(jià)檢測(cè):檢測(cè)第三次免疫、第四次免疫后的效價(jià),免疫血清效價(jià)>1:128000
抗體純化:使用修飾性與非修飾性多肽兩輪親和純化
抗體驗(yàn)證:WB和IF、流式驗(yàn)證純化后抗體,也可根據(jù)需求提供SDS-PAGE、ELISA鑒定
交付內(nèi)容
多肽、未純化抗血清小樣、純化獲得的抗體(多抗)或大鼠、小鼠單克隆抗體(單抗)、singleB免單抗(序列)、1-3株單克隆細(xì)胞株、技術(shù)服務(wù)報(bào)告等。
最終交付的抗體經(jīng)過(guò)多重檢測(cè)驗(yàn)證,確保可特異性識(shí)別磷酸化(phosphorylated)/甲基化(methylated)/乙?;╝cetylated)的氨基酸位點(diǎn)。普健生物還可以按客戶實(shí)際應(yīng)用要求制定個(gè)性化免疫、篩選及檢測(cè)方案,以滿足客戶驗(yàn)證要求。
普健生物協(xié)助客戶發(fā)表文獻(xiàn)展示
2024年1月,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所與中國(guó)科學(xué)院武漢病毒研究所合作,在《Journal of Cell Biology》上發(fā)表了題為“BLK positively regulates TLR/IL-1R signaling by catalyzing TOLLIP phosphorylation”的研究論文。研究發(fā)現(xiàn),酪氨酸激酶BLK催化TOLLIP在Y76、Y86和Y152位點(diǎn)磷酸化,引發(fā)下游炎癥信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)。文中使用的磷酸化抗體p-TOLLIP-Y86由普健生物定制提供(詳情見下圖)。